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程序降温仪分类和使用步骤介绍

发布日期: 2020-03-26
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   程序控制冷冻装置俗称:程序降温仪,也称为程序冷冻仪、胚胎冷冻仪、细胞冷冻仪、程控降温仪;广泛用于冻存细胞、胚胎等。采用微机控制技术,专用软件,能较准确地控制液氮的施放量,从而保证被冻存的生物制品以适宜的冷冻速率降温冷冻。该仪器具有操作简便、人机界面清楚。
  程序降温仪是实现生物材料深低温保存的关键设备,根据降温及控制原理不同,可以将其分为两类:①液氮喷射式降温仪。②升降式降温仪。它们均以液氮为制冷源。程序降温仪主要由冷却室、低温电磁阀、风扇、温度传感器、放大电路、微处理机和液氮容器组成。
  液氮喷射式降温仪适合较大容积样本的降温保存,优点在于控温精确,受外界环境干扰小,但是其价格昂贵,液氮消耗量大,液氮中如有少量水分就会造成输送管道堵塞和低温电磁阀失灵。
  升降式降温仪由液氮容器、步进机、微机控制系统和记录仪组成。它是利用液氮的自然蒸发在杜瓦瓶颈部所形成的温场(0~-196℃),由步进机根据预先设定的降温、复温程序控制生物标本在此温度区内上下移动的速率,来控制标本的温度和降温速率。
  程序降温仪步骤:
  (1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。
  (2)配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、血清,逐滴加入二甲基亚砜(DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。
  (3)离心收集培养之细胞,用加血清的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1ml)计数细胞浓度及冻前存活率。
  (4)取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSOzui后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ml,混合均匀,分装于已标示完全之冷冻保存管中,1~2ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
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